from PyQt5.QtCore import QLockFile
from PyQt5.QtWidgets import QApplication, QMessageBox
import time

lock_file = QLockFile("file.lock")
if not lock_file.tryLock():
    a = QApplication([])
    QMessageBox.warning(None, "Ошибка повторного запуска",
                        "Приложение уже запущено!")

time.sleep(15) # имитируем работу приложения 15 секунд
# файл будет удален
lock_file.unlock()

import logging
from PyQt5.QtNetwork import QNetworkCookieJar, QNetworkCookie
from PyQt5.QtCore import QFile, QTemporaryFile


class FileCookieJar(QNetworkCookieJar):
    def __init__(self, filename, parent=None):
        super().__init__(parent)
        self.log = logging.getLogger(self.__class__.__name__)
        self.filename = filename
        self.load()

    def load(self):
        f = QFile(self.filename)

        if not f.open(QFile.ReadOnly):
            self.log.warning(f.errorString())
            return

        data = f.readAll()
        cookies = QNetworkCookie.parseCookies(data)
        self.setAllCookies(cookies)
        self.log.info("cookies loaded")

    def save(self):
        # В Qt нет блокировки записи?
        # Записываем данные во временный файл
        temp = QTemporaryFile()
        # Предотвращаем автоматическое удаление файла
        temp.setAutoRemove(False)

        # A QTemporaryFile will always be opened in
        # QIODevice::ReadWrite mode...
        if not temp.open():
            self.log.warning(temp.errorString())
            return

        for cookie in self.allCookies():
            temp.write(cookie.toRawForm())
            temp.write(b'\n')

        # Удаляем исходный файл
        source = QFile(self.filename)

        if not source.remove():
            self.log.warning(source.errorString())

        # Переименовываем временный файл в исходный
        if not temp.rename(self.filename):
            self.log.warning(temp.errorString())
        else:
            self.log.info("cookies saved")

    def __del__(self):
        # Так же метод save можно вызывать в setCookiesForUrl
        self.save()